发菌温度：20~22℃，空气湿度：60%~70%，避光、空气循环良好。料温控制在22~25℃，二氧化碳浓度控制在2000~4000ppm。
茶树菇发菌期有一种特殊的杏香味，易招蚊虫，要注意病虫防治。发菌期注意翻堆调节垛温，严防高温烧菌，发菌发至将近一半时解开系绳，但是不撑开袋口，少量通气，这个时候就可以把污染菌棒全部挑出来。当发菌快发满时完全撑开袋口，撑开袋口的同时，需要把菌种块剥离菌棒。出现未发满的菌棒，集中到一起，等待发满后再撑开袋口。
发满菌丝后，一般需要2周以上的后熟期。
生理成熟标准：①菌龄：适温下扎袋口菌袋50~55d。打穴接种40~45d。②色泽：菌丝浓白、涨势旺盛。气生菌丝呈棉绒状、有的吐黄水。③菌棒硬实并富有弹性。重量较开始时降低20%。
