1、采集养殖材料
为获取罗汉果优质种质资源，繁育罗汉果优质组培苗，有关专家和技术人员深入果园广泛调查研究，比较筛选果园、品种，长期观察其长势、开花和座果情况，选择在生长健壮、来花及时、挂果容易、果大整齐的品种和单株上采集枝条。
2、消毒处理
剪取约50cm的嫩梢，在组培室工作台上用无菌水冲洗后浸入75%酒精溶液中消毒5s，然后浸入0.1%升汞溶液中消毒10min，取出后再用无菌水冲洗干净。
3、茎尖脱毒培养
①配制培养基基本培养基用MS+BA1.0mg／L+IAA0.1mg／L+琼脂0.35%+蔗糖3%，pH值调至6。把配制好的培养基进行分装，每瓶装约2cm高，拧紧盖子，高压灭菌后让其自然冷却备用。
②切取茎尖分生组织切取0.5～1mm的茎尖分生组织，然后接种到培养基中进行培养。
4、切段继代培养
①配制培养基继代培养基用MS+BA0.5mg／L+IAA0.1mg／L+IBA0.5mg／L。
②切段继代培养当茎尖分生组织培养出的小苗长至6cm高时进行切段，每段带一个节间约0.5cm，接种到继代培养基上进行继代培养。如此反复继代5～6次，然后转入生根培养基上诱导生根。培养室温度为24～29℃，光照强度800～1200Lx，每天光照12h。
5、诱导生根培养
2005年开始，把在兴安经4～5次继代培养的准备用于生根培养的瓶苗运到南宁，利用南宁1～4月的气候条件进行组培苗生根培养和大棚炼苗。
①配制培养基诱导生根培养基用MS+BA0.03mg／L+NAA0.3mg／L+0.01%活性炭。
②接种挑选已培养了20d以上、生长健壮、无污染的继代培养的瓶苗作为生根培养的种苗，放到无菌的铅垫板上用摄子钳住愈伤组织，用剪刀把苗上的叶子剪掉，再按一芽一段剪断，要求基部比顶部长，然后按照基部、茎段、顶芽分别均匀插到不同培养瓶的培养基中进行培养，每瓶接10株。
⑧生根苗的培养前期：25℃，暗培养5d，湿度85%；中期：28℃，光照1800LX，每天光照12h，湿度85%；后期：25℃，光照1500LX，每天光照12h，湿度85%。10d后均可陆续生根。
6、炼苗
当组培生根苗长出约0.5cm长，就可搬到大棚内进行练苗。初搬到大棚前2d不能让强光直射小苗。2～3d后把瓶盖打开，开盖后马上喷水保湿以防萎蔫，喷水后用湿报纸盖上。2d后可以把报纸适当掀开，但仍然要避免强光直射，10d后即可移栽。
7、移栽
①大棚的消毒地面用生石灰粉进行消毒，大棚四壁及棚顶采用吡虫啉、菊脂类农药、甲基托布津三种农药混合溶液喷洒。
②营养土装杯用塘泥作培养基质，装入7cm×6cm的营养杯中。然后用500倍的多菌灵溶液淋透消毒。
③洗苗将选出来的正常苗放到水里，清洗粘附在基部的培养基，把洗好的苗放到500倍的多菌灵液中浸泡5s，再用800倍生根粉液浸泡15min。
④种植用勺子把泥土挖起来后，把处理好的苗基部放进坑里再把泥土盖回来，立即淋透水，然后盖上薄膜成小拱棚以保温保湿。
8、大棚育苗
①杀菌成活前要对小苗进行杀菌，每个早上揭膜喷洒多菌灵水溶液，给小苗杀菌补水，以抑制杂菌滋生。
②保温2月份室外气温低，需要大棚保温，在大棚内再搭小拱棚保温。
③光照2月份阳光不是很强烈，但小苗受不了阳光的强烈照射，出太阳时要盖遮阳网以防灼伤小苗。初期管理要特别细心、认真，随时观察天气的变化和小苗的生长况状，及时采取适当措施管理。
④揭膜小苗成活后便进入生长中期，温度相对稳定的白天，可以把膜揭开让其逐步适应大棚内环境，晚上再将膜盖起来；而到天气较温暖时晚上也不需要盖膜。
⑤施肥用多得富尔露，磷酸二氢钾，复合肥等肥料进行追肥。
9、出棚
3月下旬，组培苗叶色浓绿、茎粗壮、高6cm以上时就可以开始出圃。用硬竹筐或塑料筐装运。
