液体菌种的制作技术如下文:
配方①葡萄糖3%、玉米粉1%、豆饼粉2%、碳酸钙0.20%、磷酸二氢钾0.10%、酵母粉0.50%、硫酸镁0.05%,将各成分溶于水中混匀,配制成悬浮液,煮沸30分钟后取上清液定溶,装入盛有10粒小玻璃珠的500毫升三角瓶中。
配方②马铃薯20%、蛋白质0.20%、葡萄糖20%、磷酸二氢钾0.05%、硫酸镁0.05%、氯化钾0.01%、马铃薯按常规方法提取滤液,添加其他成分后定溶装入瓶。
配方③玉米粉5%、酵母粉0.50%、蔗糖4%、碳酸钙0.20%、VB1毫克、制作方法与配方①同。
培养基灭菌与设施设备消毒
母种斜面培养基。液体培养基高压灭菌用每平方厘米1.10千克,在121℃温度下灭菌30分钟,固体菌种培养基在灭菌后立即排放斜面,斜面长度占试管长度1/2为宜。
原种、栽培种培养基。高压灭菌用每平方厘米1.50千克压力,在121℃温度下灭菌1小时。麦粒为原料的培养基适当延长灭菌时间。也可用常压蒸汽灭菌,即在100℃温度下持续灭菌8小时。
设施消毒。接种室、培养室、操作室用福尔马林加热熏蒸,也可用硫磺粉燃烧熏蒸,用量福尔马林每立方米空间10毫升,硫磺粉每立方米空间15克;用次氯酸钙(每平方米20—40克)水溶液,2%—3%来苏儿喷洒地面和墙壁。
设备消毒。超净工作台及其各种工具用70%酒精或5%石碳酸0.25%新洁尔灭浸泡擦洗。接种前,打开紫外线灯灭菌15分钟。