当菌袋走满菌丝后，再经过10天左右，积温在1600-2000℃时，搬入事先经消毒的厂房内开口中。
开口前菌袋用0.5%高锰酸钾液体冲洗，干后用刀片在菌袋顶部割开3厘米左右小口或剪去扎口以上薄膜袋，盖上薄膜。简单的方法是把袋口解开，拉直薄膜，上面覆盖报纸。
此阶段室内保持温度20-28℃，空间相对湿度70-75%。开口后不宜直接喷水，以免感染杂菌。开口5天后如湿度过高，早晚通风10-15分钟，湿度过低，可在人间喷水增湿;开口后12-16天时，空间喷雾要求空气相对湿度应达到80-90%;大量出菇时要求提高到90-95%，不超过97%。
菌丝从营养生长转入生殖阶段，料面颜色起变化，初期出现黄水，继而出现深褐色斑块，接着出现小菇蕾。只要温度、湿度适合，开口后15-20天内开始陆续出菇。
